洞察を最大化
タンパク質、総mRNA、形態情報を1つにまとめ、サンプルをさらに詳細かつ包括的に評価
組織切片全体のプロファイル
対象となる領域を絞り込むことなくタンパク質と全トランスクリプトーム発現を視覚化
アクセスしやすいテクノロジー
標準的な顕微鏡技術、免疫蛍光染色プロトコール、抗体を使用
効率化されたデータ解析
使いやすいソフトウェアで組織学とタンパク質発現プロファイル、遺伝子発現データを統合解析
ラボ作業は1日
わずか1日で組織切片からシーケンス可能なライブラリーを作製
多様なサンプルに対応
複数のマウスおよびヒト組織で実証済み
さらなる可能性を探る
複雑な疾患の全体像を把握
新規バイオマーカーを発見し、新しい細胞タイプや状態を特定
細胞アトラスの空間的な位置情報をマッピング
時間空間的な遺伝子発現パターンの同定
柔軟な空間的プロファイリング
全トランスクリプトーム解析、あるいは興味のある遺伝子にフォーカスしたターゲット遺伝子発現パネルをタンパク質発現データと組み合わせ、マルチオミックスに関する知見を探索
高度にマルチプレックスされたタンパク質検出(今後の予定)
Feature Barcodeテクノロジーを使ったマルチオミックス解析を実施すると、蛍光標識法と比べて多数のタンパク質検出が可能になります。
包括的な10xソリューションで可能になること:
パワフルな探索
タンパク質の検出と全トランスクリプトーム解析によって、新たに発見された細胞タイプ、細胞状態、バイオマーカーの空間的な構成を解明します。
シームレスな統合
同一ライブラリーから全トランスクリプトームおよびターゲット解析をシームレスに行い、検証実験や新たな仮説の探索を可能にします。
フォーカスしながら拡張
タンパク質の発現パターンを元に、高スループットの空間的遺伝子発現と効率のよいターゲットパネルを組み合わせることで、興味のある数遺伝子から関連するすべての遺伝子およびパスウェイへと実験のスケールを拡張できます。
実績のある結果
実績のある結果
論文
数百にもわたる論文から空間的遺伝子発現を使った結果を検索できます。
Transcriptome-scale spatial gene expression in the human dorsolateral prefrontal cortex
Transcriptome-scale spatial gene expression in the human dorsolateral prefrontal cortex
bioRxiv, 2020, Kristen R. Maynard, et al.
bioRxiv, 2020, Kristen R. Maynard, et al.
Spatiotemporal dynamics of molecular pathology in amyotrophic lateral sclerosis
Spatiotemporal dynamics of molecular pathology in amyotrophic lateral sclerosis
Science, 2019, Silas Maniatis, et al.
Science, 2019, Silas Maniatis, et al.
A Spatiotemporal Organ-Wide Gene Expression and Cell Atlas of the Developing Human Heart
A Spatiotemporal Organ-Wide Gene Expression and Cell Atlas of the Developing Human Heart
Cell. 2019, Michaela Asp, et al.
Cell. 2019, Michaela Asp, et al.
Spatial maps of prostate cancer transcriptomes reveal an unexplored landscape of heterogeneity
Spatial maps of prostate cancer transcriptomes reveal an unexplored landscape of heterogeneity
Nature Communications. 2018, Emelie Berglund, et al.
Nature Communications. 2018, Emelie Berglund, et al.
エンドツーエンドのソリューション
Visium 組織最適化用スライド
新たな装置の導入を必要とせず、既存の研究室にある装置で容易に実験スタート
Visium 空間的遺伝子発現試薬
組織切片全体の空間分解能で全トランスクリプトーム遺伝子発現を捉える試薬類
グローバルな技術・カスタマーサポート
専門サポートチームがメールと電話で対応
必要な製品
Visium空間的プロテオミクスには以下の10x Genomics製品をご利用ください。
- Visium Spatial Tissue Optimization Slide and Reagent Kit
(1000193)
- Visium Spatial Gene Expression Slide and Reagent Kit
(1000187: 4 rxn, or 1000186 : 16 rxn)
- Dual Index Kit TT Set A, 96 reactions
(1000215)
解析・視覚化ソフトウェア:
- Space Ranger
(バージョン1.1以降)
- Loupe Browser
(バージョン4.1以降)
その他に必要なもの:
- 組織学または免疫蛍光染色のプロトコールに必要な機器および試薬
- デジタル画像の取り込みと出力が可能な顕微鏡装置
- シーケンス装置
サポートページでは、Visium空間的遺伝子発現のワークフローで使用されている製品の詳細なサマリーと、推奨される対応製品を紹介しています。
ワークフロー
- 1
サンプル準備
新鮮な凍結組織から切片を作り、遺伝子発現スライドのキャプチャー領域に貼り付けます。キャプチャー領域には何千ものバーコード化されたスポットが搭載されています。各スポットには固有の空間的バーコードを含むキャプチャーオリゴが数多く含まれています。
リソース - 2
組織染色と画像化
形態観察用としてのヘマトキシリン・エオジン(HE)染色、またはタンパク質検出用の免疫蛍光(IF)など標準的な染色技術と固定方法を利用します。明視野顕微鏡または蛍光顕微鏡を使用してスライド上の組織切片を視覚化し、下流の解析で空間的な遺伝子発現データと組み合わせるために用いる組織画像を取得します。
リソース - 3
組織の透過処理とライブラリー構築
組織を透過させて細胞からmRNAをリリースし、スポット上に並ぶ空間的バーコードオリゴ配列に結合させます。逆転写反応を行い、キャプチャーしたmRNAからcDNAを生成します。その後、バーコードが付いたcDNAをプール化し、シーケンス可能なライブラリーを調製します。
リソース - 4
シーケンス
10xバーコードが付加したライブラリーは、標準的なNGSショートリードシーケンサー(イルミナ)と互換性があります。組織切片全体から大量の転写プロファイリングを実施します。
リソース - 5
データ解析と視覚化
Space Ranger解析ソフトウェアを使って空間的遺伝子発現データを処理します。Loupe Browser視覚化ソフトウェアでは、インタラクティブに探索できます。
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Loupeは、誰でも簡単にダウンロードして使用できるクリックベースのソフトウェアです。
リソース
よくある質問
Visium空間的遺伝子発現 免疫蛍光のリリースにより、Visiumの解析および視覚化ソフトウェアは免疫染色されたサンプルから最大6種の蛍光シグナルを一度に表示できるようになりました。10x GenomicsではVisium空間的遺伝子発現 免疫蛍光のワークフローを使用して、4種の蛍光シグナルの検出を検証し、最大3種の抗体とDAPIについてサポートしています。検出できるタンパク質の最大数は、最終的には実験デザインとイメージングシステムの構成によって決まります。
はい。標準的なIFとVisiumで使用されるIFプロトコールでは重要な違いがいくつかあります。詳細についてはIF実証済みプロトコールをご参照ください。
Visiumアッセイは感度が高いため、Visiumの性能への影響は組織ごとに異なります。しかし、遺伝子発現の空間的な構成や細胞クラスターの検出はH&EとIFで同程度です。
VisiumはmRNAを含む新鮮な凍結組織と互換性があります。現在のところ、Visium空間的遺伝子発現は固定サンプルタイプには対応していません。しかし、将来的には可能になるように積極的に取り組んでいます。
テストに成功した組織は こちらから.
10x Genomicsでは、Space RangerとLoupe Browserというデータ解析に役立つ2種類のソフトウェアを用意しています。Space Rangerは、組織画像上に空間的な遺伝子発現情報を自動的に重ね合わせ、スポット単位で転写プロファイルの類似性からクラスターを識別する解析ソフトウェアです。その後、視覚化ソフトウェアであるLoupe Browserを使い、結果をインタラクティブに探索することができます。Space RangerとLoupe Browserは、10xサポートサイトから無償でダウンロードできます。